甲基化特异性pcr（msp）
【技术简介】
（1）技术原理
甲基化特异性的pcr是一种灵敏度高且操作相对简单的甲基化研究方法。重亚硫酸盐处理dna后，基因组dna发生的由甲基化状态决定的序列改变。随后进行引物特异性的pcr。该方法引物设计是关键。msp中设计两对引物，即一对结合处理后的甲基化dna链（引物对m），另一对结合处理后的非甲基化dna链（引物对u）。检测msp扩增产物，如果用引物m能扩增出片段，则说明检测位点存在甲基化；若用引物u扩增出片段，则说明被检测的位点不存在甲基化。
（2）技术应用
肿瘤的早期预测、分类分级、预后评估及多种疾病的分析；转录水平分析：位于启动子区域的甲基化一般会抑制转录；细胞凋亡等调控机制的研究。
【服务内容】
根据待测基因序列设计相应引物；基因组dna的提取和质量检测；亚硫酸氢钠修饰基因组dna；修饰后dna纯化回收；根据实验的要求进行bsp或者qmsp实验；实验结果的分析以及向客户提供实验报告。
【客户须知及标本要求】
（1）组织样品：新鲜组织放入液氮或-80度保存，组织不少于100mg；
（2）培养细胞：通过细胞计数取不少于2×106个细胞于ep管，加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，混匀后保存于冰箱（-80℃，避免反复冻融）；
（3）血液细胞标本：以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，保存（-80℃可长期保存，避免反复冻融）；
（4）血清或细胞培养液标本：离心去掉杂质后取上清入ep管，保存（4℃可保存15-20天，-80℃可长期保存，避免反复冻融）；
（5）样本运输：可选择以下任何一种方式寄送标本
组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后，加冰袋寄送；
细胞样本也可直接寄送培养瓶（密封保证不污染、培养液不漏出）；
血清或上清液直接加冰袋寄送（运送视路程远近2-3天可到达）。
