实时荧光定量pcr(qrt-pcr)
【技术简介】
(1)技术原理
实时荧光定量pcr(real-time pcr,qrt-pcr)是指在pcr反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个pcr进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法,已广泛用于基因表达研究、转基因研究、病原体定量检测、疾病分类及其发病机理等生命科学领域。
(2)技术应用
dna或rna的相对定量分析:包括病原微生物或病毒含量的检测,转基因动植物转基因拷贝数的检测;基因表达差异分析:比较经过不同处理的样本之间特定基因的表达差异(如药物处理、物理处理、化学处理等)、特定基因在不同时相的表达差异。
【服务内容】
rna抽取与定量;反转录;引物设计及荧光定量pcr、数据分析。
【客户须知及标本要求】
(1)客户须明确检测目的和具体要求,最好能提供1~2篇文献或资料。
(2)提供新鲜样品,组织样本:质量大于100mg;细胞样本,细胞数大于106;全血样本(edta抗凝):2~5ml。
(3)提供待测基因的全长基因序列或ncbi中的序列号。
(4)提供尽可能详细的背景资料: dna/ rna 来源、丰度等,如果是cdna序列请标明外显子拼接位点。