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免疫沉淀


【技术简介】

(1)技术原理

免疫沉淀(immunoprecipitationip)是利用抗原抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后,再与protein ag或二抗偶联的agaosesepharose beads孵育,通过离心得到beadsprotein ag或二抗-抗体-目的蛋白复合物,沉淀经洗涤后,重悬于电泳上样缓冲液,煮沸510 min,在高温及还原剂的作用下,抗原与抗体解离,离心收集上清,上清中包括目的蛋白和少量的杂蛋白。

(2)技术应用

    免疫沉淀常用于测量蛋白质抗原的相对分子质量,监控其翻译后修饰,研究蛋白质的半衰期等。     

【服务内容】

蛋白质抽取与定量;ip产物的sds-pageip(以normal lgg作为对照);western blot或质谱分析。

【客户须知及标本要求】

1)客户须明确检测目的和具体要求,最好能提供1~2篇文献或资料;

2)客户提供待检测样品、免疫沉淀用抗体(也可由我方代购);

3)待检测样品可以是直接待检测蛋白样品,也可以是细胞、组织或细菌样品,需加收蛋白抽提费用。样本收集后应立即-80℃保存。

 

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