双荧光素酶报告基因检测（microrna 靶基因验证）
【技术简介】
（1）技术原理
双荧光素酶报告基因实验也是验证microrna与靶基因或靶位点相互作用的常用技术。mirnas常与靶基因的非翻译区（常为3’utr）结合，从而抑制整个mrna的翻译。在体外验证实验中，常将预测靶基因的3’utr或预测靶位点构建至荧光素酶编码区的下游，从而根据发光情况判断mrna与预测靶基因的直接作用关系。
（2）技术应用
microrna广泛存在于动物、植物、真菌及病毒的基因组中，调控生物体生长发育和各种疾病发生等过程中相关基因的表达。它的异常表达可能会导致生理状态的异常和疾病的产生，在多种癌症中，mirna的表达水平会发生明显改变，有可能引起原癌基因和抑癌基因的异常表达，从而导致肿瘤的发生恶化等。此外，在许多其他的病变组织或细胞中也检测到了mirna的异常表达。mirna可同时调控多个靶基因，从而影响细胞的功能。mirna调控靶基因的验证常是荧光报告素酶活性检测，结合软件预测及蛋白验证，提高靶点预测的精确性及可行性。
【服务内容】
构建荧光素酶载体（或客户自备载体）；细胞培养与转染；荧光素酶检测；数据分析。
【客户须知及标本要求】
（1）客户须明确检测目的和具体要求，最好能提供1~2篇文献或资料；
（2）客户可自备载体；
（3）客户需提供：mirna与靶基因的信息；相应检测细胞株。
